>>No.61953834
别急，让子弹飞一会

这项研究获得了弗雷德-哈钦森癌症研究中心机构审查委员会的批准（编号5369；协议1707）。研究对象为无神经系统疾病或患有注意力缺失症的女性，共计59名死者。其中 26 名女性没有神经系统疾病。33名女性患有注意力缺失症（表1）。这些女性的脑解剖标本来自两个机构之一：华盛顿州西雅图市华盛顿大学病理学系或马萨诸塞州贝尔蒙特市麦克林医院哈佛脑组织资源中心。华盛顿大学的标本取自死亡后两年内无神经系统疾病临床史且脑组织学未显示疾病证据的成年女性，以及生前被诊断为可能患有注意力缺失症19[0,19]且符合美国国立老龄化研究所-里根研究所共识的注意力缺失症神经病理学诊断标准16[0,20]的女性。同样，哈佛大学脑组织资源中心（Harvard Brain Tissue Resource Center）的标本也来自无神经系统疾病或符合 AD 临床和病理标准的成年女性。死亡年龄从 32 岁到 101 岁不等（表 1）。华盛顿大学的 AD 患者发病年龄已知（中位数：77 岁；范围：64-93 岁）。尸体解剖后，大脑标本或用福尔马林固定，或用液氮冷冻。根据可用性，从每个受试者身上获取两到十二个脑区的样本。调查的脑区包括额叶、顶叶、颞叶、枕叶、扣带回、海马、杏仁核、尾状核、丘脑、苍白球、丘脑、延髓、脑桥、小脑和脊髓。与无神经系统疾病的受试者相比，患有注意力缺失症的受试者每人提供的标本数量更多，但在统计学上并无显著差异（平均值：分别为 3.6 对 2.5；P = 0.05）。综合两家机构的受试者，患有注意力缺失症的受试者死亡时的年龄明显较大（p<0.001）；死后间隔（PMI）没有明显差异（p = 0.06；表 1）。女性大脑中男性 Mc 的最可能来源是女性在怀有男性胎儿时获得的男性 DNA。受试者的怀孕史有限，大多数受试者的怀孕史不详。已知九名女性至少有一个儿子，其中八人患有注意力缺失症，一人没有神经系统疾病。已知有两名女性没有生育过儿子，其中一名患有注意力缺失症，另一名没有神经系统疾病。
每个受试者检测标本数量的中位数为 3 个，范围从 1 个到 12 个不等。表 2 总结了所有受试者脑区标本中男性 Mc 的流行率。每个脑区有 2 到 35 个标本进行了男性 DNA 检测。虽然标本数量较少，但我们在额叶和柱状体中没有检测到男性DNA，而在延髓中发现男性DNA的流行率最高。综合考虑所有受试者，Mc浓度范围为0-512.5 gEq/105，中位值为0.2，第90百分位数为3.7 gEq/105（图1）。哈佛大学脑组织资源中心的一名无神经系统疾病的受试者（编码为 B6388；死亡年龄 69 岁）的三个标本在我们的数据集中具有最高的浓度值（分别为颞叶、扣带回和脑桥的 296.1、481.8 和 512.5 gEq/105）。通过荧光原位杂交，我们确实在 B6388 的大脑中发现了罕见的雄性细胞（图 S2）。数据集中的其余浓度值为 29.4 gEq/105 或更低。关于妊娠史与Mc患病率之间的关系，在已知至少有一个儿子的九名受试者中，有五名受试者的至少一个脑区存在雄性Mc（表S3）。所有阳性者都患有注意力缺失症；阴性者中有三人患有注意力缺失症，一人没有神经系统疾病。在两名没有生育过儿子的女性中，有一人的脑部雄性Mc也呈阳性，但没有神经系统疾病；阴性者患有注意力缺失症。

然而，由于受试者的妊娠史和从妊娠到死亡的时间间隔一般都不清楚，因此无法评估死亡年龄与之前妊娠并怀有男性胎儿的男性Mc之间的任何关系。(However, any relationship between age at death and male Mc from prior pregnancies with a male fetus could not be evaluated because pregnancy history and the time interval from pregnancies to death were generally unknown from our subjects.)

在 183 份标本中，有 64 份（35%）Mc 检测呈阳性（表 2）。在 26 名无神经系统疾病的受试者中，有 18 人（69%）至少有一项检测结果呈阳性，其中 65 份标本中有 30 项检测结果呈阳性（46%）。33 名 AD 受试者中有 19 人（58%）至少有一个阳性结果，118 份标本中有 34 个阳性结果（29%）。单变量模型的估计 OR 值为 0.47（95% 置信区间 (CI) 0.21-1.08，P = 0.08）。对检测的总 gEq、死亡年龄和 PMI 进行调整后，AD 与较低的 Mc 患病率显著相关： OR 0.40 (95% CI 0.17-0.93, p = 0.03)。因此，Mc检测呈阳性的受试者患AD的几率比Mc检测呈阴性的受试者低60%。根据受试者是否患有神经系统疾病来分析Mc浓度时，调整模型得出的估计RR为0.05（95% CI 0.01-0.39，p = 0.004）。然而，如果排除没有神经系统疾病的受试者 B6388 的脑标本，其雄性 Mc 的浓度比另一受试者的次高浓度高出 10 倍，则估计结果会发生显著变化： RR 0.41 (95% CI 0.16-1.05, p = 0.06)。因此，AD 患者的 Mc 检测率比无神经系统疾病患者的 Mc 检测率低 59%，但无统计学意义。在单变量模型或调整模型中，死亡年龄与Mc患病率也没有统计学意义（根据疾病状态和总gEq测试进行调整；p = 0.79）。然而，由于受试者的妊娠史和从妊娠到死亡的时间间隔一般都不清楚，因此无法评估死亡年龄与之前妊娠并怀有男性胎儿的男性Mc之间的任何关系。
我们进行了二次分析，仅考虑了被认为受注意力缺失症影响最大的五个脑区的标本：杏仁核、海马、额叶、顶叶和颞叶18[0,30], 21[0,31]。仅考虑这些区域，24 名无神经系统疾病的受试者中有 12 人（50%）至少有一个阳性结果，24 个标本中有 12 个阳性结果（50%）。33 名患有 AD 的受试者中有 13 人（39%）至少有一个阳性值，44 个标本中有 15 个阳性结果（34%）。描述 Mc 患病率与疾病状态相关性的调整 OR 为 0.48（95% CI 0.14-1.62，P = 0.23）。因此，与检测结果呈阴性的受试者相比，在受该疾病影响最严重的脑部区域Mc检测呈阳性的受试者患上AD的几率要低52%，但在统计学上并不显著。不过，没有神经系统疾病的受试者都没有提供杏仁核或额叶的标本。比较各组的麦克浓度，排除受试者 B6388 的一份标本，调整后的 RR 为 0.27（95% CI 0.13-0.56，p<0.001）。因此，各组间阳性标本的比例并无显著差异，但患有 AD 的受试者脑标本中的 Mc 浓度往往低于无神经系统疾病的受试者。在其他分析中，Mc患病率或浓度与Braak分期之间没有显著关联（表1；p分别为0.99和0.93），Mc患病率与HLA-DRB1*1501之间也没有显著关联（11名DR15携带者中有8名Mc阳性（73%），31名无DR15携带者中有16名Mc阳性（52%）；p=0.13）。

在这项研究中，我们首次描述了男性 Mc 在女性人脑和特定脑区中的存在。我们的研究结果与脑脊液中存在雄性 DNA 的数据18[0,32]共同表明，胎儿 DNA 和可能的细胞可以穿过人的血脑屏障（BBB）并在大脑中驻留。在怀孕期间，血脑屏障的通透性会发生变化3[0,33]，因此可能为 Mc 在大脑中的建立提供了一个独特的机会。我们的研究还发现，人类女性大脑中雄性 Mc 的出现频率较高（63% 的受试者呈阳性），且分布在多个大脑区域，并有可能在人的一生中持续存在（大脑中检测到雄性 DNA 的最年长女性为 94 岁）。

小鼠研究首次表明，Mc 可穿透人体 BBB 进入大脑，小鼠大脑中同时存在外来细胞和 DNA 0[0,14]、7[0,15]。然而，小鼠脑中Mc的流行率还没有得到很好的界定，因为不同的研究报告的频率不同14[0,14]、6[0,15]、23[0,34]-19[0,36]，在一项调查中没有观察到Mc34[0,37]。与小鼠的数据类似，我们对人类的研究发现，并非所有受测者的大脑中都存在 Mc。即使是那些总体呈阳性的人，也不是所有的脑区都有 Mc。Mc的浓度也有相当大的差异。总体而言，我们的数据补充并扩展了其他报告中描述的普通人群、外周血中以及研究对象内部和之间的组织/器官水平上的 Mc 3[0,9]-2[0,13]。目前还无法将人脑中的Mc流行率或浓度与其他组织进行有意义的比较，因为我们的研究对象没有其他组织。此外，之前对其他器官中 Mc 进行评估的研究采用了不同的方法，其中一些方法并不是定量的。

女性大脑中男性 Mc 的最可能来源是与男性胎儿一起怀孕时获得的胎儿 Mc。在没有儿子的女性中，男性 DNA 也可能来自流产或堕胎 11[0,22]、2[0,23]、16[0,38]-7[0,40]。在目前的研究中，除少数受试者外，其他受试者的妊娠史均不详，因此无法根据具体的妊娠史评估女性大脑中的男性 Mc。除了先前的妊娠史，男性 Mc 还可能是女性从已确认或消失的男性双胞胎40[0,41]-12[0,43]、年长的男性兄弟姐妹或通过非辐照输血获得的43[0,44]。

由于 AD 在女性中的发病率高于男性，而且有报道称，经产妇比非经产妇的发病风险更高，并且与发病年龄相关1[0,16]-6[0,18]，因此我们也对 AD 女性患者中的男性 Mc 进行了调查。AD 是一种神经退行性疾病，其特征是淀粉样蛋白斑块水平升高、脑血管淀粉样变性和神经纤维缠结23[0,30]。我们的研究结果表明，女性 AD 患者大脑中雄性 Mc 的流行率较低，而且在受 AD 影响最严重的区域中雄性 Mc 的浓度也较低，这出乎我们的意料。然而，接受测试的受试者人数不多，而且如前所述，怀孕史在很大程度上是未知的。如果这一观察结果能在更大规模的研究中得到重复，那么AD中Mc减少的原因还不明显。在其他疾病中，胎儿来源的麦氏蛋白既有有益的影响，也有有害的影响，这取决于多种因素，包括麦氏蛋白的具体类型和来源3[0,6]。目前研究的一个重要局限是无法区分男性 Mc 的类型和来源，而进一步研究区分基因正常和异常 Mc 将是有潜在意义的。

目前，人脑中携带 Mc 的生物学意义还需要进一步研究。Mc似乎在血液、骨骼和骨髓中持续存在数十年1[0,2]、37[0,45]，并存在于不同的造血系中6[0,46]。此外，Mc 似乎还能整合并在组织中生成特定类型的细胞 3[0,10]、6[0,11]、39[0,47]-20[0,49]。在小鼠研究中，已观察到母体大脑中的胎儿 Mc 在形态和表型上类似于血管周围巨噬细胞、神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞，并占据各自的龛位 3[0,15]，29[0,36]。因此，大脑中的 Mc 有可能分化成各种成熟的表型，或与原有细胞融合并获得新的表型，小鼠和人类研究表明，骨髓衍生细胞循环到大脑并通过分化产生神经元细胞，或与原有神经元融合23[0,50]-25[0,53]。最后，有几项研究报告称，奇偶性与脑癌风险降低之间存在关联，这就提出了一种可能性，即Mc可能有助于对致瘤细胞进行免疫监视，就像其他一些类型的恶性肿瘤一样5[0,6]，42[0,54]-22[0,56]。

总之，男性 Mc 在人类女性大脑中频繁出现且分布广泛。虽然大脑 Mc 与健康和疾病之间的关系还需要进一步研究，但我们的研究结果表明，胎儿来源的 Mc 可能会影响母体健康，并可能具有进化意义。(In conclusion, male Mc is frequent and widely distributed in the human female brain. Although the relationship between brain Mc and health versus disease requires further study, our findings suggest that Mc of fetal origin could impact maternal health and potentially be of evolutionary significance.)

这是研究方法的论文翻译

图 1. 男性 Mc 在女性大脑区域的浓度。

通过 qPCR 检测未患任何神经系统疾病（开圆圈）或患有注意力缺失症（填充圆圈）的女性大脑标本中的雄性 DNA。每个点代表一个唯一的大脑标本。端脑由新皮质区（额叶、顶叶、颞叶和枕叶）、边缘区（海马、杏仁核和扣带回）以及基底节区（普坦门、尾状核和苍白球）组成。间脑由丘脑组成。菱脑由延髓、脑桥和小脑组成。由于端脑和菱脑收集的数据点较多，为了更好地展示它们的分布情况，我们将每组数据并排绘制。对间脑和脊髓的数据没有进行这样的分离。

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0045592.g001

表 2. 无神经系统疾病或患有阿尔茨海默氏症的女性个别脑区中男性 Mc 的患病率。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0045592.t002

代表性大脑样本的 DYS14 扩增图。图中显示的是一名女性 AD 患者扣带回样本的扩增图。

人类女性大脑中的男性微嵌合体

显示 2/5: 图_S2.tif
通过荧光原位杂交检测雌性大脑中的雄性细胞核。用 X 和 Y 染色体的特异性荧光探针与受试者 B6388 经福尔马林固定、石蜡包埋的脑桥进行杂交。组织切片去石蜡、复水、在 44% 甲酸和 0.3% 过氧化氢溶液中变性 15 分钟，然后在抗原检索溶液（Dako, Carpinteria, CA）中用传统食品蒸锅孵育 30 分钟以上。使用 0.2 N 盐酸进一步变性 20 分钟。用含 0.05% 吐温-20 的 2× 氯化钠/柠檬酸钠（SSC）洗涤切片，在 42°C 的 2×SSC 中孵育 30 分钟，然后在 37°C 下用胃蛋白酶（DIGEST-ALL™ 3，Dako）处理 10 分钟。将切片脱水、风干，用杂交混合物（10% 硫酸葡聚糖、2×SSC 和 50% 甲酰胺）稀释 X 和 Y 染色体特异性荧光探针，并用盖玻片涂抹。X 和 Y 染色体探针先前已有描述（Lau et al. Lancet 1∶14-16; Waye and Willard. Nucleic Acids Res 13∶2731-2743），使用 FISH Tag™ DNA Kit（Molecular Probes, Eugene, OR）分别与 Alexa Fluor 555 和 488 连接。探针在 90°C 下变性 10 分钟。杂交在 37°C 加湿室中过夜 16 小时。杂交后，用 2×SSC 冲洗切片，然后用含有 50% 甲酰胺的 2×SSC 冲洗两次，最后用 2×SSC 冲洗。杂交后的洗涤均在 42°C 下进行，时间为 5 分钟。用含有 1 mM 硫酸铜的 50 mM 乙酸铵缓冲液（pH 5）处理切片 30 分钟以减少自发荧光，然后用含有 4′,6-二脒基-2-苯基吲哚的 VECTASHIELD® 安装介质（Vector Laboratories, Burlingame, CA）安装。为便于在大量雌核背景中发现罕见雄核，使用 TissueFAXS 系统（TissueGnostics USA, Tarzana, CA）的荧光模式和 40× 目标值对切片进行自动扫描观察。对同时表达红绿信号的细胞核进行手动图像检查。在油浸下使用 100 倍瞄准器重新检查推测的雄性细胞核，并在选择 Z-stack 选项的情况下采集图像。使用 Volocity® 3D 图像分析软件（PerkinElmer, Waltham, MA）对图像进行解卷积。图中显示了一个雄性细胞核的例子（用箭头表示，并在白框中重新显示），最终放大倍数为 400 倍。在对包含假定雄性细胞核的 Z 叠图像进行解卷积后，证实杂交信号位于细胞核位置（未显示）。

( ﾟ∀。)一点也不欢乐恶狗了

还有三张关于人类女性大脑中的男性微嵌合体d1报告
需要的话可以去辅助信息里后三张看一看
我就翻译到这了
1对一个家庭进行 HLA 基因分型，以调查母亲大脑中的胎源微嵌合体。
2通过 HLA 特异性 qPCR 对母体大脑中的胎儿来源微嵌合体进行定量。
3已知至少有一个儿子的妇女的麦克患病率和浓度。
ᕕ( ᐛ )ᕗ

看不懂，有无结论( ﾟ∀。)7

>>No.61954291
( ﾟ∀。)b肥哥辛苦了

>>No.61954291
( ﾟ∀。)b肥哥辛苦了

>>No.61954291
( ﾟ∀。)b肥哥辛苦了

来个gpt总结一下( ﾟ∀。)

>>No.61954291
( ﾟ∀。)b肥哥辛苦了